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飼料中維生素E的HPLC檢測方案

近期,隨著經濟的復蘇,維生素類飼料添加劑銷售量大大增加,尤其是維生素E飼料添加劑,所以飼料中維生素E的檢測就顯得尤為緊急和重要。

賽智科技應用檢測部參考國標(GB/T 17812-2008),利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀經實踐檢測可提供飼料中維生素E的HPLC檢測方案,得出的結果準確可靠,檢出限好,適用于配合飼料、濃縮飼料、復合預混合飼料、維生素預混合飼料中維生素E(dl-α-生育酚)的測定,僅供廣大用戶參考。

以下是維生素E的測定的詳細檢測方法。

1、儀器與試劑

1.1 儀器

LC-10Tvp高效液相色譜儀

Vertex 色譜柱?。?50mm×4.6mm×5μm

分析天平,感量為0.0001g

圓底燒瓶,帶回流冷凝器

恒溫水浴鍋

旋轉蒸發(fā)器

超純水器

1.2  試劑

碘化鉀溶液。

淀粉指示液。

硫代硫酸鈉溶液。

水乙醚:不含過氧化物。

無水乙醇。

1,4-二氧六環(huán)。

甲醇,色譜純。

2,6-二叔丁基對甲酚(BHT)。

氫氧化鉀溶液。

酚酞指示劑。

氮氣(純度99%)。

L-壞血酸。

維生素E(dl-α-生育酚)對照品。

2、試樣溶液的制備

2.1  皂化

稱取適量試樣,置入圓底燒瓶中,加L-壞血酸乙醇溶液,使試樣完全分散、浸濕,置于水浴上加熱直到沸點,用氮氣吹洗稍冷卻后,加氫氧化鉀溶液,混合均勻,在氮氣流下沸騰皂化回流,不時震蕩防止試樣粘附在瓶壁上,皂化結束,分別用無水乙醇、水自冷凝管頂端沖洗其內部,取出燒瓶冷卻至40℃。

2.2 提取

定量的轉移全部皂化液于盛有無水乙醚的分液漏斗中,用蒸餾水分2次~3次沖洗圓底燒瓶并入分液漏斗,加蓋、放氣,隨后混合,激烈震蕩,靜置、分層。轉移水相于第二個分液漏斗中,分次用乙醚重復提取兩次,棄去水相,合并三次乙醚相。用蒸餾水多次洗滌乙醚提取液至中性,初次水洗時輕輕旋搖,防止乳化。乙醚提取液通過無水硫酸鈉脫水,轉移到棕色容量瓶中,加BHT使之溶解,用乙醚定容至刻度。

2.3 濃縮

從乙醚提取液中分取一定體積置于旋轉蒸發(fā)器燒瓶中,在部分真空、水浴溫度50℃的條件下蒸發(fā)至干或用氮氣吹干。殘渣用甲醇溶解并稀釋,離心或通過0.45μm過濾膜過濾,用于高效液相色譜儀分析。

3、色譜條件

色譜柱:VertexC18(4.6 mm×250 mm×5 μm)

流動相:甲醇:水=98:2

流速為:1.0mL/min

進樣量:20μL

檢測波長為:285 nm

柱溫:室溫

4、色譜圖

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